Сервис вопросов и ответов

Ответы

  1. Далия Окулова

    Получение штамма бактерий – это многоступенчатый процесс, требующий соблюдения строгих правил асептики и стерильности для предотвращения контаминации (загрязнения) культуры посторонними микроорганизмами. Последовательность действий может незначительно варьироваться в зависимости от конкретной цели и используемого оборудования, но общая схема выглядит следующим образом:

    1. Отбор образца: Исходный материал (например, почва, вода, продукты питания, образец с больного) подвергается отбору. Важно правильно выбрать место отбора для получения репрезентативного образца, содержащего целевые бактерии.
    2. Разбавление и посев на агар-пластинку: Образец разбавляют (если необходимо) для снижения концентрации микроорганизмов и предотвращения перегруженности среды. Затем небольшое количество разбавленного образца высевают на плоскую питательную среду, содержащую агар. Агар обеспечивает необходимую питательную основу для роста бактерий.
    3. Инкубация: Пластинку помещают в условия, обеспечивающие оптимальный рост бактерий (обычно температура 25-37°C). В процессе инкубации происходит размножение бактерий, образующих отдельные колонии на агаре.
    4. Выбор чистой культуры: После инкубации необходимо выбрать колонию, содержащую только один тип бактерий – ‘чистую культуру’. Это критически важно для получения штамма с определенными свойствами. Визуально оценивают морфологию колоний (размер, форма, цвет, структура) и выбирают наиболее подходящую.
    5. Пересев на среду: Выбранную колонию переносят стерильным инструментом (например, петлей или иглой) на новую питательную среду (обычно в пробирку с жидкой средой или на агар-пластинку). Этот этап повторяют несколько раз (2-3 раза и более), чтобы убедиться в чистоте культуры. Каждый пересев – это новый ‘поколение’ бактерий, происходящих от исходной колонии.
    6. Идентификация: Для подтверждения принадлежности бактерий к определенному виду проводят идентификацию. Это может включать микроскопические исследования (окраска по Граму), биохимические тесты (проверка на ферментацию различных веществ, образование газов и т.д.), а также молекулярно-генетические методы (например, анализ ДНК).
    7. Криоконсервация или лиофилизация: Для длительного хранения полученного штамма его консервируют. Криоконсервация предполагает хранение при очень низких температурах (-80°C или ниже), а лиофилизация – высушивание бактерий в вакууме, что позволяет им сохранять жизнеспособность в течение длительного времени.
    8. Депонирование: Консервированный штамм депонируется (хранится) в специальном банке генов или коллекции микроорганизмов для обеспечения его доступности для научных исследований и практического применения.

    Важно помнить, что получение и хранение бактериальных штаммов требует строгого соблюдения правил безопасности и использования соответствующего оборудования.

    Ответить
Добавить ответ